本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：人类白细胞抗原C(HLA-C)酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人类白细胞抗原C(HLA-C)含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人类白细胞抗原C(HLA-C)水平。用纯化的人类白细胞抗原C(HLA-C)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人类白细胞抗原C(HLA-C)，再与HRP标记的HLA-C抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最△终的黄色。颜色的深浅和样品中的人类白细胞抗原C(HLA-C)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度Ψ (OD值)，通过标准曲线计算样品中人类白细胞抗原C(HLA-C)浓度。
试剂盒组成
1 20倍浓缩洗涤液 30ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品(180μg/L) 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀▂释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
人类白细胞抗原C(HLA-C)酶联免疫分析试剂盒标本要求
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献↓进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
标准品的∞稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀;然后从第一孔◥、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别☆加标准品稀释液50μl，混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加☉到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液◥50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120μg/L，80μg/L ，40μg/L，20μg/L， 10μg/L)。
加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同▓)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触√及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封∩板后置37℃温育30分钟。
配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加◢入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加★入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终☆止液50μl，终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
