本试剂盒仅供研究使用。猪补体】成分3(C3)ELISA试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定血清、血浆及相关液体样本中待测物质的含量。
猪补体成分⊙3(C3)ELISA试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加→入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波◥长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。
试剂盒组∮成

猪补体成分3(C3)ELISA试剂盒标本要求
1．标本采集后尽早ㄨ进行提取，提取按□相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根♂过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的ㄨ稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下◥列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各↓步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上』▓标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底〗部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动＠ 混匀。
3.温育：用封板』膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶■标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入▽显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立■转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依︻序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液▽后15分钟以内进行。
操作程序总结：

计算
以标准物的浓≡度为横坐标，OD值为▲纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用♂标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归▂方程式，将样品的OD值代◥入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方↙可使用，酶标▂包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会【有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准】确性，以避免试◥验误差。一次加「样时间最好控制在5分钟内，如标本数量∩多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标♀本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第＠ 一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后◥乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按╲传染物处理。
9．本试剂不同批◆号组分不得混用。
10．如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：2-8℃。
2．猪补体成分3(C3)ELISA试剂盒有效期：6 个月