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CA1020 (20T)
详细说明
货号:CA1020
规格:20T/50T/100T
保存:贮存于 2-8°C,复检期为一年。建议Annexin V-FITC打开后,分装成小份冻存于-20°C。
产品说明:
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V是一种分子量为35.8 KD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)高亲和力特◇异结合。FITC-Annexin V结合到凋亡↑细胞后,在蓝色光的激发下,发出绿色荧光,区分出凋亡细胞卐与正常细胞。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一种核酸染料,它不能穿透完整细胞膜,但对凋亡晚期细胞和死细胞的破损细胞◤膜能够穿透,并使细胞核红染。将FITC-Annexin V与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期⊙的细胞区分开来。
操作步骤: 1. 调整待测细胞的浓度为5×105-1×106个/ml。 2. 取1ml细胞,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清。 3. 加入1ml预冷的PBS,轻轻震荡使细胞悬浮,1000rpm,4℃离心10分钟,弃上清(对于贴壁细①胞,先用胰酶消化,再用PBS洗涤)。 4. 重复步骤3两次。 5. 将细胞重悬于200μl Binding Buffer。 6. 加入10μl Annexin V-FITC和10μl PI,轻轻混匀,避光室温反应15分钟 或4℃反应30 分钟。 7. 加入300μl Binding Buffer,在1小时内用流式细胞仪检测。 8. 若用荧光显微镜检测,将细胞混合液离心,取细胞沉↓淀涂片,再进行观察。