人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA Kit
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ELISA酶联免疫№试剂盒特异性好，灵敏度高。
它的方法类型和操作步骤如下：ELISA可用于测定抗
原，也可◆用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的
试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或ζ 抗体，③
酶作用的底物︾。根据试剂的来源和标本的性状▽以及检测的
具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。
（一）双抗体夹卐心法
双抗体夹心法：是检测抗原最常用的方法，操作步
骤如下：
（1）将特异性抗体与固相载体连接，形成固Ψ 相抗体
：洗涤除去未结合◤的抗体及杂质。
（2）加受检标本：使之与固相抗体接触反应一段时
间，让标本⊙中的抗原与固相载体上的抗体结合，形成固相
抗原复合物。洗涤除去其他未结合的物质。
（3）加酶标抗〖体：使固相免疫复合物上的抗原与酶
标抗←体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体
上带有的酶量与标本中受检【物质的量正相关。
（4）加底物：夹心式复合物中的酶催化底物成为有
色产物。根据颜色反应的程度进行该抗原的定性或♀定量。
根据同样原理，将大分子抗原分◆别制备固相抗原和酶
标抗原结合物，即可用双抗原夹心法测定标本中的抗体。
（二）双︻位点一步法
在双抗体夹心法测定抗原时，如应用针对抗原分子上
两※个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为⌒ 固相抗体和酶
标抗体，则在测定时可使标本的加入和酶标抗体的加入两
步■并作一步。这种双位点一步不但简●化了操作，缩短了反
应时间，如应用高亲和力的单克隆抗体，测定的敏感①性和
特异性也显著提高。单克隆抗体的应用使测ㄨ定抗原的
ELISA提高到新水平。
在一步法测定中，应注意钩状♂效应（hookeffect），
类同于沉淀反应中抗原过剩的后带现象。当标本中待测抗
原浓度※相当高时▓，过量抗原分别和固相抗体及酶标抗体结
合，而不再形ぷ成夹心复合物，所得结果将低于实际含量。
钩状效应严重时甚至可出现假阴性结果。
（三）间接法测抗体↘
间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标
记的抗抗体以检测已与固相结々合的受检抗体，故称为间接
法。操作步骤如下：
（1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相■抗原
：洗涤除去未结合的抗原及杂质。
（2）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结
合，形成固↑相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体︻上只
留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不
能与♂固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。
（3）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体☆结合，
从而使该抗体间接地标记上酶。洗涤后，固相▂载体上的酶
量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体
，可用酶标羊抗〓人IgG抗体。
每个试剂盒操作是不同的，请按说明书操作。具体
事项请来∑电咨询！
