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                紫外」分析仪的原理及其应用

                教育装备采购╱网卐 2019-01-02 16:17 围观611次

                  紫外分析仪是荧光▽的应用,荧光是什么呢? 了解下什么是荧光,荧光又作"萤光",是指种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射,吸收光能后入激发态,并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且旦停★止入射光,发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。 知道了什么是⌒荧光,顾名思义就能想到什么】是荧光。荧光是某些物质受定波长的光激发后,在短时间△内(10-8秒)会发射出波长大于激发波长的光,这种光称为荧光。这发光现象在各方面的应用及有关▲的方法称为荧光(fluorescent technique)。

                  物质经过紫外〓线照射后发出荧光的现象可分○为两种情况,种◣是自发荧光,如叶绿素、血红素等经紫外线照射后,能发出红色的荧光,称为自发荧光;第二种是诱发荧光,即物体经荧光染料染色后再通过紫外【线照射发出荧光,称为诱发荧↑光。

                  荧光在生物化学及分子生物学研究中应用主要包括以下几个方面:

                  1、物质√的定性:不同的荧光物质有不同的激发光谱和◣发射光谱,因此可用荧光行物质的鉴别。与吸收光谱法相比,荧光法具有更的々选择性。

                  2、定量测定:利用在较低浓度下荧光强度与样品浓度成正比这关系可以定∴量分析样品◤中荧光组分的含量,常用于测定氨∞基酸∴、蛋白质、核酸的含量。荧光定量测定的个优点是灵敏度,例如维生素B2的测定限量可达1毫微克/毫升,这优点使测定时所需要样品量大大减少。 这种定量测定方法还可▆应用于酶催化的反应,只要反应前后有荧光强度的变化,就可用来测定酶的含量【及酶反应的速率等。

                  3、研究生物大分子的物理化学性及其分子的结构和构象■:荧光的激发光谱、发射光谱、量子产率和荧光寿命等参√数不仅和分子内荧光发色基团的本身结构有关,而且还强烈「地依赖于发色团周围的环境,即对周围环境十分敏感◆。利用此点可通过测定上述有关荧光参数的变化来研究荧光发色团所在部位的微环境的征ㄨ及其变化。在此研⌒ 究中,除了利用生物大分子本身具有的荧光发色团(如色氨酸、酪氨酸、鸟苷酸等,此类荧光称为内源荧光)以外,可将些殊的荧光染料分子共价地结合或吸附在生物大分子的某部位,通过测定该染料分子的荧光性变化来研究☆生物大分子,这种染□ 料分子被称为"荧光探针",它们发出☆的荧光般称为外源荧光。荧光探针的应用,大大地开拓了〇荧光在分子生物学中的▼应用范围。

                  4、利用荧光寿命、量子产率等参数可以研究生物ζ大分子中的能量转√移现象:通过该现象的研究,可以获得生物大分子内部的许多信息。

                  以往人们◎常用荧光偏振做指标来研究生物大分子动力〗学。人们趋于用荧光偏振随时间的★衰减来研究这些问题。在这种方法中,激发光不是连续的面偏振光,而是偏振的光脉冲,因此测ω 得的F∥和F是在两个不同方向上偏振的荧¤光随时间的★衰减,它既和荧光寿命τ有关,又与分子在溶液中的运动有@关,因此常表示为F∥(t)和F⊥(t)。由它们可得相当重要的物理】量--各向异性参数A(t)。由A(t)可推测生物大』分子的形状、分子∞转动弛豫时间(即从个定向的状态到个无定向状态所要的○时间),而可以推知生物大分子的々大小、分子在溶液中的转动◎角度和时间之间的函数关系。由这些结果可以研究分子之间的相互作用、分子间结合的紧密程度、蛋白质、核酸分子的解聚程度等等。

                  另外,荧光在免疫学中亦有广泛的应用。重要的︾就是荧光抗体法。将某些荧光染料与◥血清抗体相结合,这种标记的抗体】仍可地与相应抗原发生结合,形成的复合体具有荧光性,从而可以确定抗原或♀抗体的存在及其含量。

                  利用荧光的紫外分析仪主要是物质的定∩性方面的应用,包括:

                  ⑴在科学实验工作△中检测,许多主要物质如蛋白质、核苷酸等。

                  ⑵在药物和研究Ψ中,可用来〒检查激素生物碱,维生素等各种能;产生荧光≡药品质量,别适宜◤作薄层分析和纸层分析斑点和检测。

                  ⑶在染料涂料橡胶、石油等化学行业中,测定各种荧光材料,荧光指示剂及添加剂,鉴别不同种类的原油和橡胶制品

                  ⑷纺织化学纤维中可测定不同种类的原材料。如羊毛,真←丝人纤维,棉花,合成纤维,并可检查成品质█量。

                  ⑸在粮油,蔬菜,食品,可用于检查毒素(如黄》曲霉素等),食品添加剂,变质◣的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的质量。

                  ⑹在地质、考古等,可起到发现△各种矿物质,判别文物「化石的真伪。

                  ⑺在公安可检查指纹、测定密写字迹等。

                  

                点击进入北京美华仪科技有限公司展台查看更多 来源:教育装备卐采购网 作者:北京美华仪科技有限公司 责任编辑:张肖 我要投稿
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